澳门新甫京娱乐娱城(官方认证)平台-Macau Store

您的浏览器版本过低,为保证更佳的浏览体验,请点击更新高版本浏览器

以后再说X

当前位置:首页>>新闻动态

发布时间:2023-05-16 14:18:15 查看次数:

文献速递丨胃癌肿瘤内高水平的GIRT+CD4 T细胞跟预后不良相关

胃癌肿瘤内高水平的GIRT+CD4 T细胞跟预后不良相关

本文是上海交通大学医学院附属仁济医院在iScience发表了题为“High-level of intratumoral GITR+ CD4 T cells associate with poor prognosis in gastric cancer”的文章,影响因子:6.1074,文章阐述了胃癌中的高水平GITR阳性CD4 T细胞与胃癌的不良预后相关,本文主线清晰,实验设计简洁合理,从单细胞数据分析入手,经不同组织体外实验,流式及多色免疫荧光验证,明确GITR与胃癌预后不良相关,给需要类似研究某一肿瘤微环境相关指标参考。澳门新甫京娱乐娱城平台病理承担了文章中多色免疫荧光部分的工作。

期刊名称:iScience

影响因子:6.1074

研究背景 作者先总结了糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体蛋白(Glucocorticoid-induced TNFR-related protein,GITR) 在前人的研究:小鼠模型中出现了明显的抑瘤作用,但在临床实验中可能由于表达方式不同并没有出现相似的效果;作者通过单细胞数据分析及后续流式实验、多色免疫荧光实验得到验证:GITR与胃癌不良预后有关;对于他的作用机制还需要进一步研究。

其他相关指标:

GITR在调节性T细胞和活化T细胞中高表达,在初始T细胞和记忆T细胞中低表达; 其配体GITRL主要由抗原提呈细胞如树突细胞和B细胞表达; 活化后主要功能为减少调节性T细胞数量并下调其免疫抑制的功能,同时增加效应T细胞的活化和增殖,

调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs ) 发挥免疫抑制作用的一类免疫细胞,避免免疫反应的过度发生,在肿瘤过程中常因其免疫抑制作用产生促瘤效果;其标记物为CD4+CD25+Foxp3+;

CD4为辅助性T细胞(Helper T cell,TH )和调节性T细胞的通用标记物;

CD25和Foxp3为调节性T细胞的特异标记物;

CD4+CD25-Foxp3-的T细胞称为常规CD4 T细胞(Conventional CD4 T cells,Tconv );

细胞毒性T细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)发挥免疫杀伤功能的一类免疫细胞,是进行抗瘤作用的主要细胞类型,主要标记物为CD8+;

研究思路/技术路线:

scRNA-seq :作者分析了26个胃癌肿瘤组织+11个癌旁组织进行单细胞测序,测序结果解析出了13种主要的细胞类型;胃癌肿瘤组织中的CD4+ T细胞相比癌旁组织中的CD4+ T细胞,GITR表达显著上升; GITR+Tregs的LAYN、TNFRSF9、IL2RA、CCR8等免疫抑制相关分子表达上调,提示GITR与肿瘤细胞的免疫逃逸以及胃癌不良预后相关;

FC流式细胞实验:取肿瘤组织、癌旁组织、外周血(PBMCs)和肿瘤引流区淋巴结(TDLN)进行流式细胞测试; 在各类组织中,GITR在Tregs中的水平都最高,其次为Tconv 和CD8 T细胞; 在Treg群体中,来自肿瘤组织的细胞群GITR阳性比例最高 (71.58%),其次为癌旁组织(60.64%), TDLN (53.46%)和PBMCs (12.62%),证明Tregs是肿瘤微环境中GITR的主要来源。

作者进一步分析了GITR在Tregs细胞, Tconv细胞和CD8 T细胞中的百分比相关性,虽然GITR的表达在不同患者中存在差异,但我们发现GITR在Tregs细胞和 Tconv细胞上的表达在不同组织中都有很强的相关性,还发现男性患者 Tconv上的GITR的表达高于女性,在早期T期肿瘤和增殖能力较强的肿瘤中,Tconv细胞上的GITR表达显著升高等一系列发现,其次:胃癌患者的GITR+Treg细胞表达更高的FOXP3和CD25,这代表了更稳定的Treg细胞,GITR+ Tregs中还高表达免疫检查点分子CTLA-4、PD-1、OX40、LAG3和CD39; 与CD8 T细胞的共培养实验显示,GITR+ Treg可以抑制其扩增,具有更强大的免疫抑制功能。

GITR+ Tconv的免疫效应相关因子IFN-g和TNF-α表达下调,免疫调节相关因子CTLA-4表达上调, 并有和Tregs类似的免疫检查点分子表达范式; 与GITR+ Tconv和GITR+ Tregs 不同,GITR+ CD8 T细胞表现出了更高的活化和肿瘤杀伤水平;

多色免疫荧光:组织原位展示了不同亚型的调节性T细胞,数据显示高水平的GITR+ CD4 T细胞(Tregs和Tconv) 和患者预后(总生存期)呈负相关;通过生物信息学构建的另外两个队列的结果,也同样显示:高水平的GITR+ CD4 T细胞(Tregs和Tconv) 和患者预后(总生存期)呈负相关。

染色panel:CD4、Foxp3、GITR

Tregs:CD4+Foxp3+

Tconv:CD4+Foxp3-

细胞免疫荧光:一般来说,免疫检查点在细胞表面表达,并通过与它们的配体结合而起作用。 流式细胞术分析显示有部分表达是在核内,作者利用共聚焦显微镜进一步研究了GITR在Treg细胞中的位置。胃癌患者Tregs的总GITR(GITRTOT) 水平明显高于膜GITR(GITRSUR)水平, 提示有部分GITR在细胞内部表达; 肿瘤组织中Tregs的GITR大多分布于膜, 外周血中Tregs的GITR大多分布于细胞内部;GITR的细胞定位和其不同功能的关系还值得进一步研究。



首页 手机 顶部